产品特点:
ATGC®302多功能净化柱可实现检测多种真菌毒素的同时检测,配合LC-MS/MS检测仪器,定量更准确。可检测真菌毒素包括黄曲霉毒素B族、G族、M族,玉米赤霉烯酮,呕吐毒素、雪镰刀菌烯醇,T-2毒素,赭曲霉毒素,伏马毒素,3-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇,15-乙酰基脱氧雪腐镰刀菌烯醇等。
样品种类 | 样品质量 | 提取液 | 提取方法 |
花生油及其植物油等 | 5g | 20mL 84%乙腈/水 | 高速均质(≥10,000r/min)5min、摇床(200-300r/min)剧烈振荡20min或超声提取30min,用快速定量滤纸过滤并收集滤液或放入离心机(≥7000r/min离心20min)收集上清液 |
花生及其制品、坚果、面粉、小麦等粮食作物 | 20mL 90%乙腈/水 | ||
玉米面及饲料 | 20mL 95%乙腈/水 | ||
中药(2015版药典规定的19 味中药) | 20mL 95%乙腈/水或纯乙腈 | ||
酱油和醋 | 定容至25 mL 纯乙腈 |
样品净化:1
Ÿ 步骤1:向试管中加入5mL样品提取液
Ÿ 步骤2:将净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端
Ÿ 步骤3:将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中
Ÿ 步骤4:取2mL净化提取液,氮吹至干,用1mL或0.5mL初始流动相复溶,过微孔滤膜,上机分析
多功能净化柱使用流程图
建议方法:
1、溶液配制
提取液:乙腈-水-乙酸混合液(80:19:1) 初始流动相:乙腈-水-甲酸混合液(35:64.9:0.1)
2、标品中间储备液配制:
AFG2、B2、G1、B1混标(G2B2:150ppb,G1B1:500ppb):取500μL AFG2、B2、G1、B1混标母液(G2B2:300ppb,G1B1:1000ppb)加500μL乙腈。
玉米赤霉烯酮ZEN(10ppm):取200μL 50ppmZEN标品,加入4份200μL乙腈
呕吐毒素DON(75ppm):取375μL 200ppmDON标品,加入625μL乙腈
T-2毒素(1ppm):将5mgT-2用10mL乙腈溶解,配成500ppmT-2标品,用乙腈稀释500倍,配成1ppm标品
赭曲霉毒素OTA(1ppm):取100μL10ppmOTA标品,加入9份100μL50%甲醇/乙腈
伏马毒素FB1(10ppm):取200μL 50ppmFB1标品,加入4份200μL50%乙腈/水
3、加标浓度
AFG2、B2(1.5ppb)300ppb: 加15ng AFG1、B1(5ppb)1ppm:加50ng
玉米赤霉烯酮ZEN(100ppb)50ppm:加1000ng 呕吐毒素DON(750ppb)200ppm:加7500ng
T-2毒素(10ppb)5mg:加100ng 赭曲霉毒素OTA(10ppb)10ppm:加100ng
伏马毒素FB1(100ppb)50ppm:加1000ng
4、样品提取
Ÿ 取5g玉米面阴性样品,于50mL离心管中,加入六种标品中间储备液各100μL,加入19.4mL提取液混匀
Ÿ 超声提取30min,放入离心机(8000r/min离心20min),取上清液作为样品提取液
5、样品净化
Ÿ 步骤1:向试管中加入5mL样品提取液
Ÿ 步骤2:取净化柱橡胶头从试管顶端插入试管中,并向下压净化柱至试管底端
Ÿ 步骤3:将净化柱上部净化后的样品提取液倒出至样品瓶或EP管中
Ÿ 步骤4:取2mL净化提取液,氮吹至干,用1mL或0.5mL初始流动相复溶,过微孔滤膜,上机分析
6、仪器条件
色谱柱:C18 2.1*100 1.8μm 柱温:35℃ 进样量:2-5μL
流动相:A:5mM乙酸铵(含0.1%甲酸) B:乙腈(含0.1%甲酸)
Time(min) | 流速(mL/min) | A/% | B/% |
0 | 0.3 | 90 | 10 |
2 | 0.3 | 90 | 10 |
3 | 0.3 | 80 | 20 |
7 | 0.3 | 76 | 24 |
10.5 | 0.3 | 70 | 30 |
13.5 | 0.3 | 40 | 60 |
15 | 0.3 | 30 | 70 |
18 | 0.3 | 25 | 75 |
18.1 | 0.3 | 5 | 95 |
23 | 0.3 | 5 | 95 |
23.1 | 0.3 | 90 | 10 |
30 | 0.3 | 90 | 10 |
MS方法:
序号 | 目标物 | 离子对 |
1 | AFB1 | 313/241,285 |
2 | AFB2 | 315/259,287 |
3 | AFG1 | 329/243,311 |
4 | AFG2 | 331/245,313 |
5 | 赭曲霉毒素 | 404/239,358 |
6 | 呕吐毒素 | 319/69,283 |
7 | T-2毒素 | 484/185,215 |
8 | 伏马毒素 | 720/157,562.3 |
9 | 玉米赤霉烯酮 | 317/175,187 |